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Cada eyaculado se diluy volumen: volumen en diluyente de Kenney (2,4 g de leche descremada, 4,9 g de glucosa, antibitico 1 g de ticarcilina, 100 ml agua destilada estril), se dividi en 2 alcuotas, se centrifug 15 minutos a 800 g, se aspir el sobrenadante y el pellet fue rediluido con los siguientes diluyentes: 1) diluyente base: 50 % de lactosa al 11 %, 25 % EDTA-glucosa, 0,5 % Equex, 20% de yema de huevo, 5% de dimetilformamida